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        呼吸道六種病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
        A65324
        貨號(hào) 純度 規(guī)格 目錄價(jià) 會(huì)員價(jià) 庫存 數(shù)量 購買
        A65324-50T 50T 50T ¥15980.00 登錄查看
        產(chǎn)品詳情

        【產(chǎn)品名稱】

        通用名:呼吸道六種病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光 PCR 法)

        【包裝規(guī)格】

        貨號(hào):A65324

        規(guī)格:50 人份/盒。

        【預(yù)期用途】

        呼吸道腺病毒(Radv)、人偏肺病毒(HMPV)、人鼻病毒(HRV)、

        呼吸道合胞病毒(RSV)核酸的定性檢測(cè),用于呼吸道副流感

        病毒Ⅰ/Ⅲ型(PIVⅠ/Ⅲ)、呼吸道腺病毒(Radv)、人偏肺病毒

        (HMPV)、人鼻病毒(HRV)、呼吸道合胞病毒(RSV)感染

        的輔助診斷及流行病學(xué)監(jiān)控。

        【檢測(cè)原理】

        本試劑盒根據(jù)熒光 PCR 技術(shù)原理,針對(duì)呼吸道副流感病

        毒Ⅰ/Ⅲ型(PIVⅠ/Ⅲ)、呼吸道腺病毒(Radv)、人偏肺病毒

        (HMPV)、人鼻病毒(HRV)、呼吸道合胞病毒(RSV)設(shè)計(jì)

        特異性引物和 Taqman 探針,通過熒光定量 PCR 儀進(jìn)行擴(kuò)增,

        從而實(shí)現(xiàn)對(duì)呼吸道副流感病毒Ⅰ/Ⅲ型(PIVⅠ/Ⅲ)、呼吸道腺

        病毒(Radv)、人偏肺病毒(HMPV)、人鼻病毒(HRV)、呼

        吸道合胞病毒(RSV)核酸的檢測(cè)。

        【主要組成成分】

        【儲(chǔ)存條件及有效期】

        1.避光-20±5℃儲(chǔ)存,有效期 12 個(gè)月。

        2.采用泡沫箱加冰袋的運(yùn)輸方式,運(yùn)輸不超過 4 天;開封

        后避光-20±5℃儲(chǔ)存;反復(fù)凍融不超過 6 次。

        3.生產(chǎn)日期、有效期至:見外包裝盒。

        【適用儀器】

        適 用 于 ABI 7500 、 Bio-Rad CFX96 、 Roche

        Lightcycler480I、Lightcycler480II、cobas Z480、宏

        石 SLAN-96S、SLAN-96P 等實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀。

        【樣本要求】

        1.樣本類型:上呼吸道標(biāo)本(包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽

        抽取物、深咳痰液);下呼吸道標(biāo)本(包括呼吸道抽取

        物、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液、肺組織活檢標(biāo)本);

        組織培養(yǎng)物等樣品。

        2.保存條件:采集的樣本應(yīng)及時(shí)送檢,24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)的

        應(yīng) 4℃保存,超過 24 小時(shí)的-70℃保存(如無-70℃保存

        條件,待測(cè)樣本可于-20℃冰箱保存 10 天),并避免反

        復(fù)凍融。

        【檢測(cè)方法】

        1.試劑準(zhǔn)備(試劑準(zhǔn)備區(qū))

        將試劑盒各組分室溫融化,充分振蕩混勻后瞬時(shí)離心。

        計(jì)算試劑使用份數(shù) N(N=樣本數(shù)+1<陽性對(duì)照>+1<陰性對(duì)

        照>),根據(jù)下表配置反應(yīng)體系,將各組分加入至同一適當(dāng)

        體積離心管中,充分混勻后瞬時(shí)離心,配制成反應(yīng)體系混

        合液,按 20μL/孔分裝至 PCR 反應(yīng)管/板,并轉(zhuǎn)移至樣本處

        理區(qū)。

         

        2.樣本處理(樣本處理區(qū))

        ① 核酸提取

        選擇合適的核酸提取試劑盒提取樣本核酸,具體按照

        相應(yīng)的試劑盒說明書操作。

        ② 加樣

        在已加入反應(yīng)體系混合液的 PCR 反應(yīng)管/板上分別加

        入處理好的待檢樣本核酸、陰性對(duì)照、陽性對(duì)照各 5μL,

        終體積為 25μL。蓋緊管蓋或封膜,瞬時(shí)離心后置熒光 PCR

        擴(kuò)增儀上檢測(cè)。

        3.?dāng)U增檢測(cè)(核酸擴(kuò)增區(qū))

        *步驟③中 55℃時(shí)熒光檢測(cè),檢測(cè)通道為 FAM、VIC/HEX、CY5。

        *ABI 系列熒光 PCR 儀不選 ROX 校正,淬滅基團(tuán)選 None。

        4.結(jié)果分析

        根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)起止值,(建議起始設(shè)在 3~15、

        終止設(shè)在 5~20,同時(shí)調(diào)整陰性對(duì)照的擴(kuò)增曲線平直或低于

        閾值線),點(diǎn)擊分析,在報(bào)告界面查看結(jié)果。

        【質(zhì)量控制】

        1.陰性對(duì)照:Ct 值>38 或未檢出。

        2.陽性對(duì)照:擴(kuò)增曲線呈典型 S 型,且 Ct 值≤35。

        3.同一實(shí)驗(yàn)以上要求需同時(shí)滿足,否則本次實(shí)驗(yàn)視為無效。

        【結(jié)果判讀】

        ①陽性判讀:

        A 管陽性判讀:

        a:FAM 通道 Ct≤35,副流感 I 型病毒陽性;

        bVIC 通道 Ct≤35,呼吸道腺病毒陽性;

        cCY5 通道 Ct≤35,人偏肺病毒陽性;

        B 管陽性判讀:

        a:FAM 通道 Ct≤35,人鼻病毒陽性;

        bVIC 通道 Ct≤35,副流感病毒Ⅲ型陽性;

        cCY5 通道 Ct≤35,呼吸道合胞病毒陽性;

        ②陰性判讀:FAM 通道或 VIC 通道或 CY5 通道 Ct 值>38

        或未檢出,判為陰性。

        ③復(fù)測(cè):

        FAM 通道或 VIC 通道或 CY5 通道 35<Ct 值≤38,

        需復(fù)檢;復(fù)檢結(jié)果若一致,判定結(jié)果為陽性。

        【檢驗(yàn)方法的局限性】

        1. 樣品采集、運(yùn)輸、保存不當(dāng),試劑運(yùn)輸、保存、配制不當(dāng)都可

        能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至?xí)?dǎo)致假陰性結(jié)果。

        2. 如果實(shí)驗(yàn)室污染、試劑污染、樣品交叉污染,可能出現(xiàn)假陽性

        結(jié)果。

        【試劑盒性能指標(biāo)】

        1. 最低檢測(cè)限:500copies/mL。

        2. 特異性:針對(duì)可能與檢測(cè)靶標(biāo)產(chǎn)生交叉的其他病原無交叉反應(yīng)。

        【注意事項(xiàng)】

        1. PCR 操作各階段應(yīng)嚴(yán)格分區(qū)操作,避免交叉污染。

        2. 試劑盒各組分使用前應(yīng)充分融化混勻,離心數(shù)秒后使用。

        3. 各組分不得與其他產(chǎn)品或不同批號(hào)的相應(yīng)成分進(jìn)行互換。

        4. 待測(cè)標(biāo)本若不及時(shí)檢測(cè),應(yīng)保存于-70℃。

        5. 樣品的處理應(yīng)該嚴(yán)格按照生物安全規(guī)范操作。

        6. PCR 操作人員應(yīng)具有經(jīng)驗(yàn)和受過專業(yè)培訓(xùn)。

        7. 本試劑盒僅用于科研使用,不做為臨床診斷使用。

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