實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)里, 胎牛血清是不可缺少的基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加劑, 它能給細(xì)胞提供生長(zhǎng)所需的好多關(guān)鍵成分。它源自新生牛臍帶的血液, 是經(jīng)過精密過濾以及滅菌處理才制成的。不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?duì)于血清的選擇和使用方法區(qū)別特別大, 選對(duì)了會(huì)有事半功倍的效果, 要是用錯(cuò)了也許會(huì)使細(xì)胞狀態(tài)不好甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。本文從實(shí)際應(yīng)用的角度出發(fā), 去分享胎牛血清的使用技巧以及選購(gòu)要點(diǎn)。
胎牛血清怎么用效果好
細(xì)胞培養(yǎng)里, 極為常見的問題當(dāng)中有一個(gè)是血清濃度的選擇, 一大批實(shí)驗(yàn)室默認(rèn)采用10%的濃度, 然而呢, 這個(gè)數(shù)值可不是始終固定不變的, 某些腫瘤細(xì)胞系對(duì)于血清的需求量是比較大的, 有可能需要15%甚至還要高些, 可是部分原代細(xì)胞或者敏感細(xì)胞, 低濃度像是5%反倒效果更佳, 建議依據(jù)具體的細(xì)胞類型以及實(shí)驗(yàn)?zāi)康娜プ鲱A(yù)實(shí)驗(yàn)摸索。
另一個(gè)關(guān)鍵步驟是熱滅活處理, 把血清56℃水浴30分鐘能夠滅活補(bǔ)體, 進(jìn)而減少某些敏感細(xì)胞的非特異性反應(yīng), 但熱滅活也有可能影響血清里某些熱敏性生長(zhǎng)因子的活性, 致使細(xì)胞貼壁能力下降, 對(duì)于常規(guī)傳代培養(yǎng)通常無(wú)需熱滅活, 只有當(dāng)進(jìn)行特殊實(shí)驗(yàn)或者細(xì)胞狀態(tài)不穩(wěn)定時(shí), 才建議做熱滅活處理。
很普遍的情況是, 不同批次之間存有差異。胎牛血清的質(zhì)量會(huì)受到采血時(shí)間、處理工藝, 還有儲(chǔ)存條件等多種因素的影響，就算是同一廠家所生產(chǎn)的同一批次的產(chǎn)品, 不同的批次仍是有可能存在著細(xì)微差別的。建議在同一實(shí)驗(yàn)當(dāng)中使用同一批次的血糖, 以此來避免因?yàn)榕尾町惗腩~外變量。新批次的血清到貨之后, 應(yīng)當(dāng)先去進(jìn)行小規(guī)模測(cè)試, 在確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)正常之后才能夠擴(kuò)大使用范圍。
胎牛血清怎么選購(gòu)放心
購(gòu)置挑選之際, 來源之地為一項(xiàng)關(guān)鍵參照指標(biāo)。當(dāng)下市面上常見的胎牛血清, 主要源自澳大利亞、巴西、美國(guó)等地方。澳大利亞地域廣闊且人口稀少, 牛群疾病檢測(cè)出的比率極低, 血清質(zhì)量相對(duì)維持穩(wěn)定。南美地區(qū)的血清性價(jià)比頗高然而在某些敏感實(shí)驗(yàn)當(dāng)中或許會(huì)出現(xiàn)效果起伏波動(dòng)。知悉了解來源之地的養(yǎng)殖環(huán)境以及檢疫標(biāo)準(zhǔn), 有助于做出更為明智恰當(dāng)?shù)倪x擇。
關(guān)鍵的同樣是供應(yīng)商資質(zhì)以及產(chǎn)品檢測(cè)的數(shù)據(jù), 正規(guī)的廠家那種會(huì)給出詳細(xì)的檢測(cè)報(bào)告單, 這里邊包含著像內(nèi)毒素含量, 支原體檢測(cè), 血紅蛋白含量這些關(guān)鍵指標(biāo)。血清要是內(nèi)毒素水平過高的話, 就會(huì)致使細(xì)胞死亡或者實(shí)驗(yàn)結(jié)果變得異常, 所以選擇內(nèi)毒素低于0.5 EU/mL的產(chǎn)品會(huì)更加穩(wěn)妥些。與此同時(shí), 去查看供應(yīng)商有沒有具備那相關(guān)的質(zhì)量認(rèn)證以及追溯體系, 這樣能大幅度地降低采購(gòu)風(fēng)險(xiǎn)。
并不是唯一考量的因素是價(jià)格, 存在隱患的是某些低價(jià)產(chǎn)品, 在生產(chǎn)工藝或者質(zhì)量控制環(huán)節(jié), 長(zhǎng)期使用會(huì)增加實(shí)驗(yàn)失敗成本, 建議綜合比較產(chǎn)品的檢測(cè)報(bào)告、用戶評(píng)價(jià)以及售后服務(wù), 選擇信譽(yù)良好的供應(yīng)商, 對(duì)于長(zhǎng)期合作的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目, 可以先采購(gòu)小樣測(cè)試, 滿意之后再批量采購(gòu), 這樣既能保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量, 又能控制成本。
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